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猪恶性水肿确诊方法(猪水肿病临床症状)

时间: 2022-07-13 20:09:34

猪恶性水肿确诊方法(猪水肿病临床症状)

  (一)细菌学检查

  1.病料采纳生前可于部分穿刺采纳水肿液。身后除采纳部分水肿液及坏死安排外,还要采纳肝、脾、肾、肺及汗水,尤以肺脏含菌较多。

  2.涂片、镜检将水肿液、汗水、脏器等制作涂片,肝脏外表作触片,天然枯燥、火焰固定后,用革兰染色法染色镜检。

  本菌是在肝外表及浆膜触片染色标本中,菌体构成微曲折的长丝状,这一形态特征在确诊上具有很重要的意义。芽孢较菌体大,呈卵圆形,坐落菌体中心或近端。能运动,无荚膜,革兰染色阳性。

  3.细菌别离培育 采纳部分水肿液或尸身的肝脏安排,放于肝片肉汤中,置37℃恒温箱中培育,24h肝片肉汤出现混浊,有沉积。经3-4d后,取沉积物0.1 - 0.5mL,接于肝片肉汤中,于80℃温水中30min后取出,冷却后置于37℃温箱中培育,待充沛发育后使用一般琼脂斜面培育,经证实无需氧菌稠浊时,使用血液葡萄糖琼脂平板进行厌氧别离培育,当见有呈弯曲长丝状、柔嫩花边样菌落,并有溶血环时,能够开始认为是糜烂梭菌。

  4.动物感染实验 取部分水肿液或尸身肝脏安排制成5-10倍悬液,或用肝片肉汤培育物0.1-0.2mL,接种于豚鼠股部肌肉,18-24h豚鼠逝世,打针部位发作严峻出血性水肿,肌肉湿润,呈鲜红色,部分水肿液涂片镜检,发现有两端钝圆的大杆菌。肝外表触片镜检,见有长丝状大杆菌时,即可确诊。

  5.荧光抗体染色法(直接法) 取肝脏外表触片数张,先用丙酮固定10min,再经磷酸盐缓冲液浸洗2 - 3min后,放人事先垫有浸湿滤纸,并在恒温箱内预热至3 7℃的大培育皿中,再滴加糜烂梭菌的荧光抗体数滴于标本片上,盖上皿盖,作用30min,取出,将标本片先后在两个盛有磷酸盐缓冲液的小缸内各浸洗5 - 7min,干后滴缓冲甘油(无水甘油9份,缓冲液1份)1滴,盖上盖玻片,于荧光显微镜下查看,如见有艳丽的黄绿色无关节长丝状菌体,即可确诊。

  取病料,然后接种于肉肝汤,在3 7 ℃厌氧培育24- 48h,纯化后进行牛乳发酵实验来鉴定产气荚膜梭菌,牛乳培育基的“猛烈发酵”是产气荚膜梭菌最杰出的生化特性,肉肝汤中5 - 6h即呈均匀污浊,并发生很多气体,接种培育于牛乳培育基中8- 10h后,牛乳即被酸凝结,同时发生很多气体,使凝块变成多孔的海绵状,严峻时被冲成数段,乃至喷出管外。糜烂梭菌在牛乳中产酸、产气,缓慢凝结牛乳。

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