hepes缓冲液的配制(hepes缓冲液的配制ph为5)
hepes缓冲液的配制方法是:准确称取HEPES 2.383g,加入新鲜三蒸水定容至1L。过滤除菌,分装后4℃保存(用于加入细胞培养液中作缓冲剂时,培养液需要避光保存)。Hepes缓冲液的用途:对细胞无毒性作用。Hepes缓冲液是一种氢离子缓冲剂,能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L,培养液内含20mmol/LHEPES即可达到缓冲能力。
配制方法如下:
1、500ml 1 M Hepes,pH=7.0 Stock solution的配制。
119.15 g Hepes溶解在400ml蒸馏水中,加0.5~1M的NaOH水溶液调节至所需pH(Hepes的有效pH范围是6.8~8.2),然后用蒸馏水定容至500ml,于4摄氏度保存。
2、加少量盐的HEPES Buffer配方(500ml)。
HEPES 6.5g、NaCl 8.0g、Na2HPO4.7H2O 0.198g、用0.5M NaOH水溶液调节pH值,最后定容。
3、2×Hepes缓冲盐溶液的配制。
将1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2HPO4、2H2O、0.2g葡聚糖(glucan or dextran)和1g Hepes溶解在90ml的蒸馏水,用0.5M NaOH调节至所需pH值,再用蒸馏水定容至100ml即可。
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